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技術(shù)文章

固相萃取技術(shù)在樣品處理中的應(yīng)用技術(shù)

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一.固相萃取技術(shù)簡介

  固相萃取(SolidPhaseExtraction,簡稱SPE)技術(shù),發(fā)展于上世紀70年代,由于其具有、可靠、消耗試劑少等優(yōu)點,在許多領(lǐng)域取代了傳統(tǒng)的液-液萃取而成為樣品前處理的有效手段。

  一些傳統(tǒng)的介紹SPE的書籍將其歸于一個液相色譜的原理,這其實是引起使用不當(dāng)?shù)闹饕从芍?。把SPE小柱看作一根液相色譜柱,不如把它看成單純的萃取劑更合適,因為:液相色譜的重點在于分離,而SPE的重點在于萃取。

  固相萃取技術(shù)在樣品處理中的作用分兩種:一是凈化,二是富集,這兩種作用可能同時存在。

  固體萃取和液-液萃取相比,其長處在于方便和消耗試劑少,短處在于批次間的重復(fù)性難以保證。出現(xiàn)這種情況的原因在于:液體試劑的重復(fù)性好,只要其純度可靠,不同年代的產(chǎn)品的物理化學(xué)性質(zhì)都是可靠的。而固體萃取劑就算保證了純度外,還存在著顆粒度的差異,外形的差異等液體試劑不存在的且難以衡量的因素,不同年代不同批號的萃取性質(zhì)可能會有較大的區(qū)別。

  從理論上和廠家宣傳來看,固相萃取應(yīng)該在色譜分析的前處理上得到很好的應(yīng)用:有機溶劑用得很少,可批量處理樣品,既可富集,又能除雜質(zhì),給人印象是前處理的革命性進步。然而現(xiàn)實情況,起碼在國內(nèi),雖然推廣了多年,實際應(yīng)用還是相當(dāng)有限。

  SPE應(yīng)用得不廣,與我們的使用方式和期望有關(guān),也與它本身的局限有關(guān)。對于供應(yīng)商來說,從經(jīng)濟利益出發(fā),向來都是忽略固相萃取的局限與不足。固相萃取可以作為前處理手段的一個很好補充,但是在使用時,一定要清醒知道到它的優(yōu)點和缺點,注意因地制宜,揚長避短。

  

  二、固相萃取的應(yīng)用優(yōu)勢

  在什么項目的前處理適合使用固相萃取技術(shù),即用固相萃取會比普通的溶劑萃取更理想,個人認為有以下幾種情況:

  (一)水中有機物的前處理。

  此類常規(guī)處理基本上是用與水不相溶的有機溶劑振蕩萃取,用固相萃取的優(yōu)勢在于

  (1)可以定量地重復(fù)前處理過程。

  溶劑振蕩的操作一般只能要求到控制時間的程度,卻無法控制振蕩頻率,強度,動作,我們知道,每個人的振蕩動作是不同的,就是同一個人,也很難保證始終劃一的動作。所以說,溶液萃取的動作是不定量,不能重復(fù)的。

  而在應(yīng)用固相萃取時,比較容易保持過柱和洗脫速度的均一和穩(wěn)定,因此,固相萃取的萃取過程是可以重復(fù),可定量的。

  (2)現(xiàn)場處理。

  水中有機物的分析有一個長期困擾我們的瓶頸。即有機物在池塘水庫等環(huán)境中能保持相對穩(wěn)定,但是一旦進入采樣瓶這個小環(huán)境中,就會迅速發(fā)生變化,所以很多水的有機物分析方法要求即采即分析,zui多不能超過4個小時,可一般的情況是,從取水回到實驗室的時間就遠遠不止4小時了,樣品發(fā)生了變化,分析結(jié)果的可靠性可想而知。

  如果引入固相萃取技術(shù),由于其設(shè)備簡單,體積小,易于攜帶,*可以做到在現(xiàn)場一邊采樣,一邊進行前處理。采樣者帶回實驗室的是固相萃取柱,而不是水樣。這樣就能保證我們處理的是真正成份穩(wěn)定的水樣。

  從實際應(yīng)用來說,在水的檢測中用固相萃取技術(shù)取代傳統(tǒng)液液萃取還有相當(dāng)?shù)墓ぷ餍枰?,目前尚不?取代,但是其發(fā)展的前景很值得看好。

  (3)有機試劑消耗量的減少。

  在處理水樣時,如果用固相萃取,則只需要在洗脫時用到有機溶劑,用量比傳統(tǒng)液液萃取要少數(shù)十倍以上。對于實驗者的人身保護和環(huán)境保護有著積極的意義。

  (二)批量生物材料的藥物成分萃取

  這是固相萃取在實際應(yīng)用中比較成功的范例,主要是指在醫(yī)院中檢測血樣和尿樣時的前處理工作,由于對藥物成份的吸附是固相萃取的優(yōu)勢,加上樣品單一,組成固定,在確定方法后很適合大規(guī)模批量的凈化操作。

  (三)免疫親和固相萃取。

  萃取的理想狀態(tài)就是特異性富集或特異性排斥,可是不論是溶液萃取還是固相萃取,基本上是相似相溶的,zui多做到“某一類”層次上的萃取,而無法達到“某一種”層次的萃取。

  在固相萃取柱的基礎(chǔ)上加上免疫親和技術(shù),可以利用其生物特異性選擇吸附,能夠達到近于理論的萃取。

 

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